杂交瘤细胞是什么？杂交瘤细胞的制作方法是什么？

杂交瘤细胞是一种在制备单克隆抗体过程中，用骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合而成的细胞。杂交瘤细胞一般通过瘤细胞培养来制备。杂交瘤技术是指两个或两个以上细胞合并形成一个细胞的现象。他可使两个不同来源的细胞核在同一细胞中表达功能。杂交瘤抗体技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。这两种细胞分别是经抗原免疫的小鼠细胞与小鼠骨髓瘤细胞。脾淋巴细胞的主要特征是它的抗体分泌功能和能够在选择培养基中生长，小鼠骨髓瘤细胞则可在培养条件下无限分裂、增殖，即所谓永生性。在选择培养基的作用下，只有b细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交细胞才具有持续增殖的能力，形成同时具备抗体分泌功能和保持细胞永生性两种特征的细胞，这种杂种细胞叫做杂交瘤细胞。

杂交瘤细胞的制作方法是什么?

1.1) 瘤细胞培养(无特殊要求)：

骨髓瘤细胞呈悬浮或轻微附着形式生长， 如附着性生长的细胞多时， 用吸管轻轻吹打或轻轻 叩击培养容器即可分离下来。 通常要维持细胞于指数生长期(细胞培养时间为 15~20 小时) ，每 3~5 天取细胞 0.2~1ml 移入到 10ml 新培养液中， 其最大细胞密度不能超过 5×10 ~10 /ml。 一般使用含有高糖的DMEM培养液，并补加有 pH 的稳定剂 HEPES。

2)免疫小鼠和脾细胞的制备：

免疫小鼠：取 6~8 周龄 Balb/C 雌鼠，基础免疫2 周，静脉再加强免疫一次，3~5 天后用于融合。

脾细胞制备： 1.引颈处死小鼠，用酒精消毒表体。

2.无菌条件下取出脾脏，剃除结缔组织和脂肪，用 5ml无血清培养液冲洗一次。

3.把脾脏置于已消毒的 90~100 目不锈钢网或尼龙纱网中。

4.在脾中部切开一小口，用注射器芯从一端轻轻压挤，再用无血清培养液冲洗，令细胞通 过纱网，收集入平皿中，或用注射器向脾脏内注入 3 ml 无血清培养液，反复抽吸数次方 法获取细胞，再制成细胞悬液亦可。

5.把细胞悬液注入 50ml离心管中，加 10~20ml 培养液，轻轻吹打数次，室温中置 5 分钟。

6.离心(800~1000 转/分)计数，备用。饲细胞的制备：常用小鼠胸腺细胞或小鼠的腹腔细胞